1927年，陳毅在中央軍事政治學(xué)校武漢分校，和惲代英、施存統(tǒng)組成校黨委，陳毅任書(shū)記，公開(kāi)職務(wù)是校政治部的準(zhǔn)尉文書(shū)。陳毅到任后，即到各大隊(duì)各支部了解情況，秘密開(kāi)展工作。由于性格開(kāi)朗，說(shuō)話風(fēng)趣，軍校師生都很愿意同他交往。他很會(huì)做思想工作，本來(lái)政治部組織科長(zhǎng)葉鏞是國(guó)民黨員，負(fù)責(zé)監(jiān)視共產(chǎn)黨人，卻在革命低潮期被陳毅發(fā)展成了共產(chǎn)黨員。

8月1日，南昌起義打響后，陳毅和二方面軍軍官教導(dǎo)團(tuán)（原武漢中央軍政學(xué)校）2000余人從武漢乘大小船只抵達(dá)九江，名義上是“東征討蔣”，歸張發(fā)奎指揮，實(shí)則是奉中共中央軍委命令準(zhǔn)備加入南昌起義部隊(duì)。船只尚未靠岸，張發(fā)奎就命令官兵把武器留在船上，徒手上岸集合。隱蔽在教導(dǎo)團(tuán)中的中共黨委書(shū)記陳毅，感到形勢(shì)嚴(yán)峻，上岸后立即召集共產(chǎn)黨員秘密開(kāi)會(huì)，提出三條應(yīng)變措施：一是暴露身份的同志連夜出發(fā)到南昌，與葉、賀會(huì)合；二是有條件的同志分散回家，搞農(nóng)民運(yùn)動(dòng)；三是未暴露身份的同志則留下來(lái)，隱蔽待機(jī)。大約有200多人愿意留下，這200多人組織了一個(gè)黨支部。當(dāng)晚，陳毅與特務(wù)連連長(zhǎng)、共產(chǎn)黨員肖勁步行到姑塘，坐小火輪前往南昌。

陳毅等人從九江出發(fā)，一路上敵人盤(pán)查得很?chē)?yán)，于是，他們抄小路前進(jìn)，一口氣走了100多里，才在一個(gè)小鎮(zhèn)找到一條船，經(jīng)鄱陽(yáng)湖進(jìn)入南昌。

8月6日，陳毅和肖勁趕到南昌后，發(fā)現(xiàn)葉、賀起義軍已經(jīng)撤離，張發(fā)奎的部隊(duì)已進(jìn)了城。他們好不容易打聽(tīng)到起義軍已去撫州方向，于是立即追趕，終于在撫州城里見(jiàn)到了緊張忙碌而秩序井然的起義軍，并找到了周恩來(lái)和劉伯承。當(dāng)時(shí)起義軍后面有朱培德的追兵，撫州附近還有楊如軒的部隊(duì)。此時(shí)，贛東一支綠林武裝派人來(lái)接頭，愿意接受葉、賀軍的委任和指揮，條件是給他們一部分槍支。周恩來(lái)、劉伯承就要陳毅帶著肖勁去聯(lián)系，到這支綠林部隊(duì)去做改造工作。但他們按預(yù)定辦法和對(duì)方的司令聯(lián)系時(shí)，起義軍已開(kāi)走，追兵已進(jìn)了撫州。綠林部隊(duì)聯(lián)系代表逃避不見(jiàn)。陳毅、肖勁出城時(shí)被哨兵抓住。幸而陳毅說(shuō)動(dòng)了哨兵，得以脫險(xiǎn)。此后，陳毅摸黑急走50多里，終于于8月10日在江西宜黃再次趕上起義部隊(duì)。

周恩來(lái)與劉伯承等商量后，分配陳毅任第二十五師七十三團(tuán)的團(tuán)黨代表。周恩來(lái)說(shuō):“派你做的工作太小了。你不要嫌?。?rdquo;陳毅真誠(chéng)而喜悅地說(shuō):“什么小不小哩！你叫我當(dāng)連指導(dǎo)員我也干。只要拿武裝我就干！”